女真為木犀科常綠灌木或小喬木，嫩枝有柔毛， 葉對(duì)生，革質(zhì)，橢圓形?；ㄆ?～7月，果期8～12月。核果即女真子，橢圓形或長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)6～12mm，幼時(shí)綠色，熟時(shí)藍(lán)黑色。原產(chǎn)于日本，現(xiàn)我國(guó)一些地區(qū)，如華東，華南，西南及華中各地已大面積引種，作為園林綠化佳木。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，女真子具有補(bǔ)腰膝，壯筋骨，強(qiáng)陰腎，烏須發(fā)，治神經(jīng)衰弱，風(fēng)熱赤嚴(yán)眼等作用，是一種兼具營(yíng)養(yǎng)和藥理作用值得開發(fā)的植物資源（1）。黃酮類化合物廣泛分布與植物界中，而且生理活性多種多樣，在花，葉，果等組織中，一般多以甙的形式存在。醫(yī)學(xué)研究表明，黃酮具有降低心肌耗氧量，使冠脈，腦血管流量增加，抗心律失常，軟化血管，降血糖，降血脂，抗氧化，消除機(jī)體內(nèi)自由基抗衰老作用，增加機(jī)體免疫力的功能（6）。從銀杏（3） 等植物中提取黃酮類化合物，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)有了很多報(bào)道，研究進(jìn)展也很快。女真子中提取黃酮卻鮮有報(bào)道。本文采用水浴方法對(duì)女真子中黃酮類化合物的提取工藝進(jìn)行了研究。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 主要儀器、試劑藥品及材料
1.1.1 主要儀器
UV-1601型分光光度計(jì)及其配套設(shè)備（日產(chǎn)）AEL-160電子天平（日產(chǎn)）電熱恒溫水浴鍋及冷凝回流裝置（北京長(zhǎng)安科學(xué)儀器廠）
SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）
1.1.2 材料與試劑
女真子:采自杭州，干燥粉碎后過(guò)40目篩；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（德思特生物）；
無(wú)水乙醇、丙酮、甲醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉，以上均為分析純
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液配制
準(zhǔn)確稱取干燥恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0.0752g，用30%乙醇溶解并定容250mL，搖勻得濃度為0.3008mg/ml標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。
1.2.2 工作曲線回歸方程的建立
分別稱取上述蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0mL， 2.0mL，4.0mL，6.0mL，8.0mL于5只25ml容量瓶中，用30%乙醇補(bǔ)充至12.5mL，加入0.7mL5%亞硝酸鈉搖勻，放置5min后加入0.7mL10%硝酸鋁， 6min加入5ml1mol/L氫氧化鈉， 混勻，用30%乙醇稀釋至刻度，10min后于510nm處比色測(cè)定，試劑為空白參比.蘆丁溶液C用最小二乘法進(jìn)行線性回歸，得蘆丁溶液C與吸光度值A(chǔ)的關(guān)系曲線的回歸方程式：C=105.318A+0.403γ=0.9999
1.2.3 實(shí)驗(yàn)步驟
1.2.3.1 正交設(shè)計(jì)
在參考文獻(xiàn)2、3的基礎(chǔ)上，通過(guò)預(yù)試，分別選定水浴的各個(gè)條件按正交表L9（34）安排四因素三水平
1.2.3.2 具體提取流程為使實(shí)驗(yàn)具有可比性，應(yīng)將抽濾過(guò)程的方法步驟統(tǒng)
一， 流程如下： 干燥2.5g→浸泡17hr→水浴→冷卻→抽濾→25ml浸提劑浸20min→抽濾→30ml浸提劑分三次洗濾→定容100ml
1.2.3.3 黃酮濃度測(cè)定
取浸提液0.5ml于25ml容量瓶，按上述1.2所用方法
測(cè)吸光度并計(jì)算黃酮含量。
2 結(jié)果與討論
2.1 水浴最佳條件及其分析四種因
素對(duì)提取結(jié)果影響大小依次為A>B>C>D，即浸提劑>浸提劑濃度>水浴時(shí)間>水浴溫度。浸提劑及其濃度的選擇是主要因素，黃酮甙類以及極性稍大的甙元，如羥基黃酮、雙黃酮、橙酮、查耳酮等，易溶于甲醇、乙醇等極性較大的有機(jī)溶劑。本實(shí)驗(yàn)顯示的最佳浸提劑是甲醇，說(shuō)明女真子中可能含有較多的大極性甙元。濃度偏低的有機(jī)溶劑易于提取，這可能是由于女真子中有易溶于水的和易溶于醇的物質(zhì)，易溶于水的部分主要是黃酮甙類及花色甙：而溶于甲醇的主要是黃酮甙元（或黃酮醇）類化合物，50%的甲醇水溶液對(duì)水溶性和醇溶性的黃酮化合物的提取都比較全面（2）。而水浴溫度等影響不大，其最佳組合為A1B1D1C2。由于B因素最好為55%甲醇溶液，是否濃度越低越好呢？為此作者以濃度梯度再做擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)50%甲醇溶液提取效果更佳。所以最終得出水浴最佳提取方法為以15倍原料重的50%甲醇溶液在65℃下浸提2小時(shí)。
小結(jié)
女真子中含有一定量的黃酮類化合物，在本實(shí)驗(yàn)所確定的最佳提取工藝條件下，即以15倍原料重的50%甲醇溶液宰65℃的水浴中浸提2小時(shí)，提取的黃酮含量為107.5mg/g。由此可見，女真子是一種很有發(fā)展前途的植物黃酮資源，具有很好的開發(fā)前景，而女真子中黃酮提取最佳條件的研究為其更好地開發(fā)利用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
