人參為五加科(Ara liaceae )植物人參panax ginseng C. A.Mey.的根。具有抗疲勞、免疫調(diào)節(jié)等作用。現(xiàn)代藥理研究證實人
參的主要有效成分為人參皂苷類化合物.人參皂苷可分為三大類,A型(即人參二醇型),B型(即人參三醇型),C型(即齊墩果酸型).有關(guān)人參皂苷的含量檢側(cè)方法已有許多相關(guān)報道.但是這些資料含量測定所用對照品種類不盡相同.在對照品的選用理由及最大吸收波長的選擇上各執(zhí)一詞,缺乏統(tǒng)一。因此,本文針對常用的幾種對照品就人參皂昔含最檢測的對照品選用問題展開較系統(tǒng)的研究(主要涉及分光光度法),希望能給廣大研究工作者提供幫助。
儀器和試劑
TU-1901紫外一可見分光光度計;可控溫水浴鍋(琴臺醫(yī)療器械廠);人參二醇、人參三醇對照品、齊墩果酸對照品、人參皂苷Re對照品(均購由德思特生物提供);所用化學(xué)試劑均為分析純.
方法與結(jié)果
對照原溶液的制備
精密稱取人參皂昔對照品5mg.置2ml容盆瓶中.加甲醉溶解并稀釋至刻度,精密吸取。.10.20,30.40.50μl.置磨口帶塞試管中.吹干溶劑。加5%香草醛-冰醋酸溶液0.2ml.高氯酸0.8 ml.于60℃水浴中加熱15min.冰水冷卻15min,加冰醋酸5 ml.搖勻.放至室溫.進(jìn)行光譜掃描。掃描波長范圍:720--200nm;吸光度范圍;0-2;掃描速度:快速,光譜帶寬2nm,采用間隔1.00nm。
從光譜掃描結(jié)果可以看出三種對照溶液在紫外光區(qū)域均受較大干擾,而在可見光范圍峰谷較為分明,因此我們在進(jìn)行含量測定時,選取可見光范圍的最大吸收波長。
穩(wěn)定性實驗研究
各取一份對照溶液進(jìn)行時間掃描。掃描波長:各對照溶液可見光范困最大吸收波長。采樣同隔60s采樣
數(shù):300。
時間掃描結(jié)果
3種對照溶液(人參二醇、人參三醇、齊墩果酸)的吸光度在5h內(nèi)均有明顯降低.減少率分別為12.88%.12.08%.10.51%;
在lh內(nèi)的減少率也分別達(dá)到4. 75%.5.59%.4.70%。因此.我們在進(jìn)行同類型樣品檢側(cè)時.操作速度要快,最好能在顯色操作完成后30 min內(nèi)完成含量測定工作。